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Sistema di microscopia a super risoluzione

Risoluzione aumentata di dieci volte in x, y e z.

La Microscopia a Ricostruzione Ottica Stocastica (STORM) ricostruisce un'immagine a fluorescenza a super risoluzione combinando informazioni di localizzazione precise per singoli fluorofori in campioni fluorescenti complessi. N-STORM sfrutta il potente microscopio invertito Ti2-E della Nikon e applica la localizzazione multicolore ad alta accuratezza e ricostruzione in tre dimensioni (xyz) per consentire imaging a super-risoluzione di dieci volte maggiore rispetto ai microscopi ottici convenzionali (fino a circa 20 nm in xy).

Questa potente tecnologia consente la visualizzazione di interazioni molecolari a livello nanoscopico, aprendo alla scienza la comprensione di nuovi mondi di comprensione.

Download Super-Resolution Brochure (15.87MB)


Caratteristiche principali

Miglioramento della risoluzione assiale di dieci volte fino a 50 nm

Oltre alla super-risoluzione laterale, N-STORM utilizza metodi proprietari per ottenere un miglioramento di dieci volte in risoluzione assiale rispetto ai microscopi ottici convenzionali e fornire informazioni di nanoscala in 3D.

La funzione 3D-Stack consente di catturare e incollare più immagini di 3D STORM da diverse posizioni Z in un immagine unica, per creare immagini STORM più spesse.

Tubulina di cellula BSC-1 marcata con Alexa Fluor®647


Miglioramento di dieci volte della risoluzione laterale fino a 20 nm

N-STORM utilizza informazioni di localizzazione ad alta precisione di migliaia di singoli fluorofori presenti in un campo visivo per creare immagini "super-risoluzione" mozzafiato, mostrando una risoluzione spaziale 10 volte maggiore rispetto ai microscopi ottici convenzionali.

Cellule umane di cancro alla cervice (HeLa S3) marcate con Alexa Fluor® 647 (NUP153) e ATTO 488 (TPR)

Foto per gentile concessione di: Dr. Michael W. Davidson, National High Magnetic Field Laboratory, Florida State University


Imaging dinamico a super-risoluzione

I sistemi ottici e di illuminazione di nuovo sviluppo, ottimizzati per la tecnologia sCMOS, hanno velocità di acquisizione delle immagini aumentate fino a 10 volte. Con tempi di acquisizione ridotti da minuti a secondi *, ora gli eventi dinamici in campioni vivi possono essere catturati con risoluzione a livello molecolare.

* Utilizzando la modalità ad alta velocità (area di imaging da 20 μm x 20 μm)


Capacità di imaging multicolore

L'imaging multicolore a super-risoluzione può essere eseguito utilizzando sia coppie attivatore-reporter per l'imaging sequenziale di attivazione, che utilizzando marcatori liberi di attivatori per imaging di attivazione continua. Questa flessibilità consente agli utenti di ottenere facilmente informazioni approfondite sulle proprietà di localizzazione e interazione di più proteine ​​a livello molecolare.

Immagine STORM a 3 colori di una cellula CV-1 colorata con anticorpi contro alfa-tubulina (Alexa Fluor® 647; magenta), caveolina (Alexa Fluor® 555; rosso) e con Alexa Fluor® 488-falloidina (verde) per f-actina


Immagini ad alta definizione e ad alta densità

L'ottica di eccitazione di nuova concezione e le migliori velocità di acquisizione dell'immagine forniscono una maggiore densità di localizzazione delle molecole, con risultato di immagini più chiare delle strutture macromolecolari.

Sinistra: Qualità dell'immagine migliorata, Destra: Prima del miglioramento
Barra di scala: 5 micron
Con lo stesso tempo di imaging la qualità dell'immagine a super risoluzione è notevolmente aumentata.
Campione: Tubulina di cellule BSC-1 marcate con Alexa Fluor® 647, tempo di acquisizione: 20 secondi


Ampia area di acquisizione dell'immagine

I nuovi obiettivi zoom intermedi nel sistema di imaging sono stati sviluppati e ottimizzati per un ampio campo visivo. La modalità di visione panoramica raggiunge 80 μm x 80 μm, un aumento dell’area di imaging di 4 volte dell'area rispetto ai modelli precedenti.


Passaggio senza interruzioni tra le modalità di imaging per esperimenti su più scale

L’ N-STORM può essere combinato simultaneamente con un microscopio confocale come l’A1 +. Una posizione desiderata in un campione può essere specificata in un'immagine confocale a basso ingrandimento/grande FOV e acquisita in super-risoluzione semplicemente cambiando il metodo di imaging. La combinazione di un microscopio confocale con un sistema di super risoluzione può fornire un metodo per ottenere viste contestuali più ampie delle informazioni di super risoluzione.


Obiettivi progettati per N-STORM

Obiettivi ad immersione in silicone

Gli obiettivi di immersione in silicone utilizzano come liquido di immersione un olio di silicone ad alta viscosità con un indice di rifrazione vicino a quello delle cellule vive. Grazie a questa migliore compatibilità dell'indice di rifrazione, questi obiettivi possono fornire una migliore capacità di raccolta di fotoni e migliore risoluzione quando viene eseguito imaging a super-risoluzione più in profondità nel campione. Presentano una correzione dell'aberrazione cromatica superiore e un'elevata trasmissione per un'ampia gamma di lunghezze d'onda.

CFI SR HP Plan Apochromat Lambda S 100XC Sil

Obiettivo ad immersione in silicone

Obiettivo ad immersione in olio

Profondità di circa 6,5 μm, Sinistra: CFI SR HP Plan Apochromat Lambda S 100XC Sil, Destra: CFI SR HP Apochromat TIRF 100XC Olio


Obiettivi ad immersione in olio

Questi obiettivi forniscono le alte aperture numeriche richieste per l'imaging N-STORM. Gli obiettivi HP sono compatibili con i laser ad altissima potenza richiesti per indurre il rapido fotoswitching dei fluorofori. Forniscono una correzione dell'aberrazione cromatica assiale migliorata per ottenere il massimo livello di precisione nella localizzazione e nell'allineamento delle immagini per l'imaging STORM multicolore 3D. Gli obiettivi di tipo AC che supportano l’Auto Correction Collar del microscopio Ti2-E consentono una regolazione precisa e semplice del collare di correzione.

CFI SR HP Apochromat TIRF 100XC Olio

CFI HP Plan Apochromat VC 100X Olio

CFI SR HP Apochromat TIRF 100XAC Olio