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Système de microscope à super résolution

Dix fois plus de résolution en x, y et z.

La microscopie à reconstruction optique stochastique (STORM) reconstruit une image de fluorescence à super-résolution en combinant des informations de localisation précises pour des fluorophores individuels dans des spécimens fluorescents complexes. N-STORM tire parti du puissant microscope inversé Ti2-E de Nikon et applique une localisation et une reconstruction multicolores de haute précision en trois dimensions (xyz) pour permettre une imagerie de haute résolution à une résolution dix fois supérieure à celle des microscopes optiques classiques (environ 20 nm dans xy).

Cette technologie puissante permet la visualisation des interactions moléculaires au niveau nanoscopique, ouvrant de nouveaux mondes de compréhension scientifique.

Télécharger Super-Resolution Brochure (15.93MB)


Caractéristiques-clés

Amélioration de la résolution axiale jusqu'à 50 nm

En plus de la super-résolution latérale, N-STORM utilise des méthodes propriétaires pour obtenir une résolution axiale dix fois supérieure à celle des microscopes optiques classiques et fournir des informations à l'échelle nanométrique en 3D.

La fonction 3D-Stack permet de capturer et d’assembler plusieurs images 3D STORM provenant de différentes positions Z pour créer des images STORM plus épaisses.

Tubuline de cellule BSC-1 marquée avec Alexa Fluor ® 647


Amélioration de la résolution latérale jusqu'à 20 nm

N-STORM utilise des informations de localisation de haute précision pour des milliers de fluorophores individuels présents dans un champ de vision afin de créer des images de "super résolution" époustouflantes, présentant une résolution spatiale 10 fois supérieure à celle des microscopes optiques classiques.

Cellules cancéreuses cervicales humaines (HeLa S3) marquées avec Alexa Fluor ® 647 (NUP153) et ATTO 488 (TPR)

Photos offertes par : Dr. Michael W. Davidson, Laboratoire national de champ magnétique élevé, Université d'État de Floride


Imagerie super-résolution dynamique

Les systèmes d’optique et d’éclairage nouvellement développés, optimisés pour la technologie sCMOS, ont permis d’accroître jusqu’à 10 fois la vitesse d’acquisition des images. Avec des temps d'acquisition réduits de quelques minutes à quelques secondes *, les événements dynamiques dans les spécimens vivants peuvent maintenant être capturés avec une résolution de niveau moléculaire.

* Utilisation du mode haute vitesse (zone d'imagerie 20 μm x 20 μm)


Capacité d'imagerie multicolore

L'imagerie à super-résolution multicolore peut être réalisée en utilisant à la fois des paires d’activateur-rapporteur pour l'imagerie à activation séquentielle et des étiquettes sans activateur pour l'imagerie à activation continue. Cette flexibilité permet aux utilisateurs d’obtenir facilement des informations critiques sur les propriétés de localisation et d’interaction de plusieurs protéines au niveau moléculaire.

Image STORM en 3 couleurs d'une cellule CV-1 colorée avec des anticorps contre la tubuline alpha (Alexa Fluor® 647; magenta), la cavéoline (Alexa Fluor® 555; rouge) et l’actine F (Alexa Fluor® 488-phalloidine ;verte).


Images de haute définition et de haute densité

Une optique d'excitation nouvellement développée et des taux d'acquisition d'images améliorés fournissent une densité accrue de localisation des molécules, ce qui permet d'obtenir des images plus claires des structures macromoléculaires.

Gauche : Qualité d'image améliorée, droite: Avant amélioration
Barre d'échelle: 5µm
La qualité d'image super-résolution est considérablement améliorée dans le même temps d'imagerie.
Échantillon : Tubuline de cellule BSC-1 marquée avec Alexa Fluor® 647, durée d’acquisition: 20 seconde


Grande zone d'acquisition d'images

De nouveaux objectifs zoom intermédiaires dans le système d'imagerie ont été développés et optimisés pour un large champ de vision. Le mode d'affichage large atteint 80 μm x 80 μm, soit une multiplication par 4 de la surface d'imagerie par rapport aux modèles précédents.


Permutation transparente entre les modalités d'imagerie pour des expériences à multi-échelles

Le N-STORM peut être combiné simultanément avec un microscope confocal tel que le A1+. Un emplacement souhaité dans un échantillon peut être spécifié dans une image confocale à grand grossissement / grand champ de vision et acquise en super-résolution en changeant simplement la méthode d'imagerie. La combinaison d'un microscope confocal avec un système de super-résolution peut fournir une méthode pour obtenir des vues contextuelles plus grandes des informations de super-résolution.


Objectifs conçus pour N-STORM

Objectifs d'immersion en silicone

Les objectifs à immersion en silicone utilisent une huile de silicone de haute viscosité avec un indice de réfraction proche de celui des cellules vivantes en tant que liquide d'immersion. En raison de cette compatibilité améliorée de l'indice de réfraction, ces objectifs peuvent améliorer la capacité et la résolution de collecte des photons lors de l'imagerie de super-résolution plus profonde dans l'échantillon. Ils présentent une correction de l'aberration chromatique supérieure et une transmittance élevée sur une large gamme de longueurs d'onde.

CFI SR HP Plan Apochromat Lambda S 100XC Sil

Objectif d'immersion au silicium

Objectif d'immersion à l'huile

Environ. 6,5 μm de profondeur, à gauche : CFI SR HP Plan Apochromat Lambda S 100XC Sil, Droite: CFI SR HP Apochromat TIRF 100XC à l’huile


Objectifs d'immersion à l'huile

Ces objectifs fournissent les ouvertures numériques élevées requises pour l'imagerie N-STORM. Les objectifs HP sont compatibles avec les lasers de ultra haute puissance requis pour induire un photo-découpage rapide des fluorophores. Ils fournissent une correction améliorée de l'aberration chromatique axiale pour atteindre le plus haut niveau de précision dans la localisation et l'alignement de l'image pour l'imagerie 3D STORM multicolore. Les objectifs de type AC qui supportent le collier de correction automatique du microscope Ti2-E permettent un réglage précis et facile du collier de correction.

CFI SR HP Apochromat TIRF 100XC à l’huile

CFI HP Plan Apochromat VC 100X à l’huile

CFI SR HP Apochromat TIRF 100XAC à l’huile