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Système de microscope confocal

Un microscope confocal qui capture des images avec un champ de vision de 25 mm, jusqu'à deux fois la surface des scanners conventionnels

La capture d'images de grands échantillons tels que des tissus, des organes et des organismes entiers nécessite d'étendre la zone détectable et d'augmenter la vitesse de capture de l'image. Le microscope confocal A1 HD25 / A1R HD25 possède le plus grand champ de vision (25 mm) du marché, permettant aux utilisateurs d'explorer au-delà des frontières traditionnelles de l'imagerie confocale.

A1 HD25 Special Site

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Caractéristiques-clés

Voir plus qu'avant dans la résolution confocale

Combinée au microscope inversé Ti2-E, la zone d'imagerie de l'A1 HD25 / A1R HD25 fournit presque le double du FOV conventionnel de 18 mm, permettant à l'utilisateur d'obtenir significativement plus de données en capturant davantage de spécimens dans chaque image.

Nouveau FOV 25mm


Moins d'images totales requises pour l'assemblage d'images de grande taille

Le grand champ de vision de 25 mm de l’A1 HD25 / A1R HD25 réduit à la fois le nombre d’images nécessaires pour assembler de grandes images et le temps d’acquisition des images, permettant une imagerie efficace et à haut débit, même à grande échelle. Le nombre d'images requises peut être considérablement réduit, en particulier pour la reconstruction de grandes images 3D (XYZ).

FOV 25 de A1 HD25 / A1R HD25: 24 images au total

FOV conventionnel 18: un total de 48 images


Augmenter le débit analytique sans compromettre la résolution de l'image

La combinaison d'un scanner résonnant à haute vitesse et d'un grand champ de vision constitue une plate-forme idéale pour les analyses de dépistage de haute résolution. Cela réduit considérablement le temps nécessaire pour analyser plusieurs échantillons et conditions sans compromettre la résolution.

Un puits dans la plaque à 96 puits est sélectionné

Le grand champ de vision permet l'acquisition de puits entiers (avec un objectif 4X)

Un grand champ de vision permet de mesurer des zones plus grandes et l’analyse de haut débit.


Scanner résonnant de haute définition et haute vitesse de l’A1R HD25

  • A1R HD25

Imagerie de haute définition jusqu'à 1K x 1K

Les 1024 x 1024 pixels permettent l'acquisition d'images de haute résolution et de haute qualité à faible grossissement, permettant la compatibilité avec une large gamme d'échantillons.

Comparaison d'une grande image de champ de vision et d'une image zoomée 6X (1024 x 1024 pixels) de structures fines dans une tranche de cerveau de 2 mm de souris de lignée avec RapiClear1.52, SunJinLab.

Image offerte par: Drs. Ryosuke Kawakami, Kohei Otomo et Tomomi Nemoto, Institut de recherche en sciences électroniques, Université de Hokkaido


Faible phototoxicité pour les cellules vivantes

La capacité d'imagerie de haute vitesse jusqu'à 720 images par seconde, combinée à un grand champ de vision, augmente considérablement le débit d'imagerie. Cette méthode de balayage réduit le temps d'exposition de l'échantillon à la lumière d'excitation, minimisant la phototoxicité et le photoblanchiment.

Scanner Galvano


Scanner résonnant

Comparaison du photoblanchiment de protéines fluorescentes entre des images numérisées par galvano et par résonance. Des images 3D en accéléré du système vasculaire du tronc chez la larve de poisson-zèbre exprimant LIFEACT-mCherry (sonde pour l’actine F) dans des cellules endothéliales ont été acquises toutes les 30 minutes sur une période de 15 heures à l'aide d'un scanner galvano (moyenne de 2 images) (moyenne de 64 images).

1024 x 512 pixels, zoom 2X, 100 images en empilement en Z

Notez que le photoblanchiment de LIFEACT-mCherry a été considérablement supprimé en utilisant le scanner résonnant.

Image offerte par: Shinya Yuge Ph.D. et Shigetomo Fukuhara, Ph.D., Département de physiopathologie moléculaire, Institut des sciences médicales avancées, Nippon Medical School


Imagerie 3D de cellules vivantes

La sécrétion de granules des cellules de Paneth en réponse au carbachol a été obtenue par imagerie 4D à grande vitesse en temps réel d'entéroïdes (61 images sur l'axe z acquises à 1,98 s / volume, en utilisant un scanner résonant d’1K et muni d’une plate-forme en Z de type Piezo). La sécrétion de granules individuels des cellules de Paneth (en vert) dans la lumière entéroïde est clairement observée avec l'imagerie 3D en accéléré de haute définition.

Vert : Zinpyr-1 (granules des cellules de Paneth), violet: CellMask TMDeep Red (membrane plasmique)

Longueur d'onde d'excitation: Résolution 488 nm, 638 nm: 1024 × 512 pixels

Image reproduite avec l'aimable autorisation de: Dr. Yuki Yokoi, Dr. Kiminori Nakamura, Dr. Tokiyoshi Ayabe, Laboratoire de l'immunité innée, Département des sciences biologiques cellulaires, Faculté des sciences de la vie avancées, École supérieure des sciences de la vie, Université de Hokkaido

Imagerie en accéléré de l'angiogenèse chez des embryons de poisson-zèbre exprimant LIFEACT-mCherry (sonde pour l’actine F) et MYR-GFP (sonde pour la membrane plasmique) dans des cellules endothéliales. Les images 3D en accéléré ont été acquises toutes les 2,5 minutes pendant 14 heures à partir de 22 heures après la fécondation à l'aide d'un scanner à résonance (moyenne de 64 images).

1024 x 1024 pixels, zoom 2X, 68 images Z-stack

La formation et la rétraction rapides des filopodes endothéliaux pendant l’angiogenèse peuvent être clairement visualisées.

Image offerte par: Shinya Yuge Ph.D. et Shigetomo Fukuhara, Ph.D., Département de physiopathologie moléculaire, Institut des sciences médicales avancées, Nippon Medical School


Images supérieures pour l'imagerie macro et micro

Capturez des images d'ensemble à grande échelle ainsi que des images très détaillées et à fort grossissement avec le même instrument. Le champ de vision de 25 mm de l’A1 HD25 / A1R HD25 est efficace pour l’observation de grands échantillons, tandis que sa haute définition 1Kx1K est idéale pour l’observation de structures minuscules.

Image d’ensemble du cerveau de marmouset reconstruite et capturée avec un objectif CFI Plan Apochromat Lambda 10X et une image détaillée des épines dendritiques capturées avec un objectif CFI SR HP Plan Apochromat Lambda S 100XC Sil


Options de détection hautement sensibles pour différents types de marquage en fluorescence

A1-DUG-2 Unité de multi-détecteurs GaAsP

L'A1-DUG-2 est un détecteur à 4 canaux équipé de PMT GaAsP de haute sensibilité, permettant l'acquisition de signaux lumineux avec un bruit de fond minimal, même lorsque la fluorescence est faible ou lorsque l'unité de détection est utilisée avec un scanner résonnant à grande vitesse.

Unité de détection A1-DUVB-2 GaAsP

L’A1-DUVB-2 est équipé d'un PMT GaAsP de haute sensibilité et permet l'imagerie spectrale à l'aide de scanners à la fois galvano et résonants. Il s’agit d’une unité de détection d’émission entièrement réglable capable d’imagerie spectrale avec des largeurs de bande d’émission définies par l’utilisateur et aussi basses que 10 nm. Le mode passe-bande variable et le mode passe-bande continu sont sélectionnables en fonction des applications et les images peuvent être désintégrées spectralement. L'option d'ajouter un second canal d'émission à largeur de bande fixe permet une imagerie multicanale simultanée.

Le mode VB (Passe-bande variable) permet une image couleur maximale de 5 canaux

Le mode CB (Passe-bande continue) permet une imagerie spectrale maximale de 32 canaux

Cellules HeLa marquées en fluorescence à cinq couleurs, Noyau: DAPI, Vimentine: Alexa Fluor ®488, Lamine: Alexa Fluor ®568, Tubuline: Alexa Fluor ®594, Actine: Alexa Fluor ®633

Spécimen fourni par: Dr Tadashi Karashima, Département de dermatologie, École de Médecine de l’Université Kurume


Unité de détection spectrale A1-DUS

L'A1-DUS peut acquérir des images spectrales à une résolution de longueur d'onde élevée d'au moins 2,5 nm. 32 canaux de spectres de fluorescence (jusqu'à une longueur d'onde de 320 nm) peuvent être acquis avec un seul balayage, permettant une imagerie rapide jusqu'à 24 images par seconde (512 x 32 pixels). L'excitation simultanée avec un maximum de quatre lasers permet une imagerie spectrale sur des bandes plus larges.

Il mélange précisément les spectres d'étiquettes fluorescentes qui se chevauchent étroitement et élimine l'autofluorescence. Le démixage en temps réel lors de l'acquisition d'images est très efficace pour l'analyse FRET.

Images spectrales et non mélangées de cellules HeLa marquées en fluorescence à cinq couleurs

Spécimen fourni par: Dr Tadashi Karashima, Département de dermatologie, École de Médecine de l’Université Kurume


La fonction unique de filtrage en V, avec sa capacité de réglage de l'intensité sans filtre, permet de sélectionner des plages spectrales arbitraires parmi 32 canaux et de les combiner pour effectuer la fonction de filtrage de quatre filtres, permettant une imagerie avec l'intensité optimale de chaque sonde fluorescente.


Technologies optiques supérieures pour toutes les applications confocales

Nikon propose une large gamme d'objectifs à NA élevée avec une qualité optique inégalée pour redéfinir les limites de l'imagerie confocale. Les options incluent des objectifs à immersion dans l'huile de silicone pour l'imagerie épaisse des cellules vivantes, des objectifs à faible grossissement et large champ de vision et des objectifs secs faciles à utiliser. Les aberrations chromatiques sont corrigées de l'ultraviolet au proche infrarouge, permettant une excellente imagerie multicolore.

Image détaillée de l'hippocampe profond éclairci avec RapiClear / SunJin Lab et capturé avec CFI Apochromat LWD Lambda S 20XC WI


Options pour l'imagerie de cellules vivantes à grande vitesse pendant la photostimulation

  • option

Un nouveau module de photostimulation, comprenant un balayage ponctuel pour la stimulation des régions d'intérêt définies par l'utilisateur, est disponible pour le système d'éclairage modulaire Ti2-LAPP et permet à l'A1 HD25 / A1R HD25 d'acquérir des images confocales tout en stimulant la zone souhaitée d'un échantillon. Un module DMD stimule simultanément plusieurs régions d'intérêt dans des formes définies par l'utilisateur.

Imagerie et photostimulation simultanées A1 HD25 / A1R HD25


Une plate-forme logicielle d'acquisition et d'analyse unifiées

NIS-Elements C, la plate-forme logicielle unifiée de Nikon, fournit un flux de travail intuitif pour l’imagerie confocale. Grâce à des outils de programmation graphiques permettant d’automatiser l’acquisition et l’analyse, l’environnement opérationnel complet peut être entièrement personnalisé pour tous les niveaux d’application.

Résolution améliorée ER

Des images de plus haute résolution peuvent être générées en un seul clic. Le logiciel évalue l'image capturée et détermine automatiquement les paramètres de traitement pour obtenir une résolution accrue. La technologie unique de traitement de l'image augmente la résolution d'image au-delà de celle d'une image confocale conventionnelle (la résolution peut être améliorée 1,5 fois (XY), 1,7 fois (Z)).

Image courtesy of: Drs. Yutaro Kashiwagi and Shigeo Okabe, Department of Cellular Neurobiology, Graduate School of Medicine and Faculty of Medicine, The University of Tokyo.


NIS-Elements HC (Analyse de contenu élevé)

Grâce à l’acquisition et à l’analyse entièrement automatisées d’un grand nombre d’images multidimensionnelles à haut contenu suivant un flux de travail simple et progressif, HCA propose des configurations expérimentales rapides et une vue immédiate des données de mesures, bien acquises et une carte thermique pour l’ observation des tendances en temps réel et l’analyse ultérieure.


JOBS

Créez facilement des modèles expérimentaux complexes et entièrement personnalisés, de l'acquisition d'images à l'analyse, sans avoir besoin de connaissances avancées en programmation de données.
JOBS permet des flux de travail intelligents intégrant l’acquisition automatique d’images avec une analyse automatisée des images et des données. Il améliore l'efficacité et réduit le temps nécessaire à l'acquisition, l'analyse et l'extraction de données.


Analyse générale

Outil de programmation graphique permettant de créer des routines d'analyse totalement personnalisées. Les utilisateurs peuvent facilement suivre des interfaces pour analyser des images de manière interactive ou automatique et produire des résultats personnalisés.