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Microscopio confocal multifotón de alta definición

Increiblemente profundo - A1R MP+ detecta el dinamismo dentro de los organismos vivos a gran profundidad.

Los microscopios confocales A1R MP + multifotón proporcionan imágenes más rápidas y nítidas en lo más profundo de los organismos vivos, ampliando los límites de las técnicas de investigación tradicionales en ciencias biológicas. Son compatibles con microscopios verticales e invertidos, y ofrecen configuraciones óptimas de imágenes multifotónicas para la investigación del cerebro, otras aplicaciones de neurociencia e imágenes en vivo de especímenes vivos.

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Características principales

Adquisición de imágenes profunda en vivo con GaAsP NDD de súper alta sensibilidad

El GaAsP NDD está equipado con un fotomultiplicador GaAsP que tiene una mayor relación señal / ruido y una sensibilidad superior que un fotomultiplicador Multi-Alkali, y permite obtener imágenes claras de áreas más profundas de especímenes vivos. Su capacidad para adquirir imágenes de alta relación S / R permite obtener imágenes más rápidamente y obtener imágenes de series espaciales en Z de mayor calidad. Su alta sensibilidad permite la adquisición de señales fluorescentes con menos potencia del láser, lo que resulta en menos daño a muestras vivas.

El Nikon A1R MP + se puede configurar con una longitud de onda de 1080 nm, así como una longitud de onda de 1300 nm que permite obtener imágenes a una profundidad de hasta 1,4 mm.

Los NDD se ubican lo más cerca posible de la muestra para detectar la máxima cantidad de señal de emisión dispersa desde las profundidades de las muestras vivas. Una combinación de NDDs GaAsP episcópicos y diascópicos para el microscopio de pie Ni-E / FN1 permite la adquisición de imágenes brillantes y de relación S / N altas, mediante la detección de señales de fluorescencia reflejadas y transmitidas.

NDD GaAsP episcópico de 4 canales

NDD GaAsP diascópico de 4 canales


Adquisición de imágenes a profundidad del cerebro en ratones in vivo con GaAsP NDD a una longitud de onda de 1300 nm

Adquisición de imágenes in vivo de un ratón YFP-H anestesiado (4 semanas de edad) mediante el método de cráneo abierto. Visualización de todas las neuronas piramidales de la capa V y las neuronas más profundas del hipocampo. Adquisición de imágenes a profundidad obtenidas para imágenes tridimensionales de dendritas del hipocampo de hasta 1,4 mm dentro del cerebro.

Capturada con GaAsP NDD episcópico para 1300 nm y Objetivo CFI75 Apochromat 25XC W 1300 (NA 1.10, WD 2.0 mm)

Longitud de onda de excitación: 1040 nm

① Células piramidales en la capa V

② Materia blanca

③ Alveolo

④ Células piramidales del hipocampo

⑤ Imagen 3D amplificada del hipocampo


Fotos cortesía de: Drs. Ryosuke Kawakami, Terumasa Hibi y Tomomi Nemoto, Instituto de Investigación de Ciencias Electrónicas, Universidad de Hokkaido


Adquisición de imágenes de excitación simultánea con láser IR de dos longitudes de onda

Los A1R HD MP + están disponibles para sistemas compatibles con la excitación simultánea de dos longitudes de onda con láser infrarrojo.

La combinación del sistema con un láser de impulsos cortos IR de femtosegundo con salida simultánea de dos longitudes de onda (salida principal ajustable de 700-1300 nm y salida fija auxiliar de 1040 nm), permite la excitación simultánea y la adquisición de imágenes de dos marcadores diferentes en el área profunda dentro de células vivas.

Adquisición de imágenes de excitación simultánea de dos longitudes de onda de un pez cebra

Imágenes tridimensionales de 1 línea transgénica de pez cebra dpf, Tg [h2afv: GFP; EF1α: mCherry-zGem]. Después de la cría bajo el tratamiento de Phenylthiourea (PTU), que inhibe la síntesis de melanina, se clareó todo el cuerpo con la solución de aclarado óptico LUCID-A. Esta línea transgénica visualiza células proliferantes y cromatina con mCherry (rojo) y GFP (verde), respectivamente.

Longitud de onda de excitación: 900 nm y 1040 nm

Objetivo: CFI75 Apochromat 25XC W 1300 (NA 1.10, WD 2.0)

Fotos cortesía de: Drs. Toshiaki Mochizuki e Ichiro Masai, Unidad de Neurobiología del Desarrollo, Universidad de Posgrado del Instituto de Ciencia y Tecnología de Okinawa


Vista lateral del tronco de la línea transgénica Tg [h2afv: GFP; EF1α: mCherry-CAAX] a 34 hpf. Después de la cría bajo el tratamiento de Phenylthiourea (PTU), que inhibe la síntesis de melanina, se clareó todo el cuerpo con la solución de aclarado óptico LUCID-A. Esta línea transgénica visualiza la membrana celular y la cromatina con mCherry (púrpura) y GFP (verde), respectivamente. SHG (azul) indica fibras musculares.

Longitud de onda de excitación: 900 nm para SHG, GFP y 1040 nm para mCherry

Objetivo: CFI75 Apochromat 25XC W 1300 (NA 1.10, WD 2.0)

Fotos cortesía de: Drs. Toshiaki Mochizuki e Ichiro Masai, Unidad de Neurobiología del Desarrollo, Universidad de Posgrado del Instituto de Ciencia y Tecnología de Okinawa


El sistema de barrido seleccionable permite adquirir imágenes de alta velocidad y de alta calidad

El A1R HD MP + es un sistema híbrido de barrido que incorpora un espejo galvanométrico (no resonante) de alta resolución y un espejo resonante de velocidad ultra rápida. Su sistema híbrido de barrido permite la adquisición de imágenes y fotoactivación a las velocidades ultrarrápidas necesarias para mostrar la dinámica e interacción celular. Un modelo de un solo galvanómetro (A1 MP +) también está disponible. Tanto el A1R HD MP + como el A1 MP + son configurables en dos longitudes de onda de 1080 nm y 1300 nm.


Imagen ultrarrápida y de alta definición con el escáner resonante HD

  • A1R MP

Capture dinámica in vivo con alta velocidad de 720 fps

1D barrido 15,600 lps
Barrido 2D 720 fps (512 x 16 píxeles)
Barrido de Fotograma entero 60 fps (256 x 256 píxeles)
30 fps (512 x 512 píxeles)
15 fps (1024 x 1024 píxeles)

El escáner resonante A1R HD MP + tiene una frecuencia de resonancia ultra rápida de 7.8 kHz, lo que permite obtener imágenes ultrarrápidas de hasta 720 fps (512 x 16 píxeles). El sistema óptico de generación de reloj de píxeles de Nikon garantiza imágenes estables, geométricamente correctas y uniformemente iluminadas, incluso a altas velocidades. Esto permite la habilidad de visualizar cambios rápidos in vivo , tales como reacciones en organismos vivos, dinámicas e interacciones celulares

Las células sanguíneas en vasos sanguíneos de un organismo vivo fueron excitadas con un láser IR pulsado de femtosegundo con el escáner resonante de velocidad ultra alta de A1R MP +, y sus movimientos se capturaron simultáneamente en tres imágenes de fluorescencia sucesivas a 30 fps (30 mseg), con tres canales de color distintos.

La excitación simultánea de tres marcadores fluorescentes son adquiridas: núcleo (azul), endotelio (verde) y plasma (rojo). El láser ultrarrápido de longitud de onda larga en combinación con el escáner resonante de velocidad ultra rápida reduce de forma efectiva la foto toxicidad y hace posible la obtención de imágenes multifotónicas de biomoléculas con suficiente resolución temporal.

Resolución de imagen: 512 x 512 píxeles, velocidad de adquisición de imágenes: 30 fps, Objetivo: objetivo de inmersión en agua 60X
Fotos cortesía de: Dr. Satoshi Nishimura, Centro de Medicina Molecular, Universidad Médica Jichi


Comparación de una imagen FOV grande e imagen detallada de estructuras finas en una porción de cerebro * 2 mm despejada de ratón H-line.
Fotografiado con la cooperación de: Drs. Ryosuke Kawakami, Kohei Otomo y Tomoni Nemoto, Instituto de Investigación para la Ciencia Electrónica, Universidad de Hokkaido

1x zoom (1024 x 1024 pixels)

6x zoom (1024 x 1024 pixels)


In vivo, gran FOV, dos fotones / SHG de oscilaciones de Ca2 + y fibras de colágeno de acinos pancreáticos vivos en un ratón anestesiado después de la estimulación agonista. Cyan: Señales SHG, Verde: GCaMP7.
Muestra: Ratón GLT1-GCaMP7 (G7NG817)
Microscopio: A1R MP +
Objetivo: CFI Apochromat LWD Lambda S 20XC WI
Foto cortesía de: Sra. Yumi Yamanaka, Escuela de Graduados de Ciencia y Tecnología de la Información, Universidad de Hokkaido, Dr. Kohei Otomo, Instituto de Investigación de Ciencias Electrónicas, Universidad de Hokkaido, Dr. Hajime Hirase, Instituto de Ciencias Cerebrales RIKEN, Dr. Tomomi Nemoto, Instituto de Investigación de Ciencias Electrónicas , Universidad de Hokkaido


Alineación automática del láser al cambiar la longitud de onda de excitación multifotónica.

Cuando se cambian longitud de onda del láser multifotónico o la precompensación de la dispersión de velocidades de grupo, la posición del rayo del láser multifotónico en la apertura trasera del objetivo también puede cambiar, produciendo una intensidad desigual en la imagen o una ligera desalineación entre las trayectorias de luz de los láseres IR y visible .

La verificación de la posición del rayo del láser IR y la configuración de su alineación es tradicionalmente difícil. La función de alineación automática de láser A1R HD MP + de Nikon, ubicada en la unidad óptica incidente para la trayectoria de luz de excitación multifotónica, maximiza automáticamente las alineaciones de láser IR con un solo clic en NIS-Elements C.

(La alineación automática del láser es posible dentro del rango de longitud de onda de 800 nm a 1300 nm)


Una plataforma de software de adquisición y análisis integrada

La plataforma de software unificada de Nikon, NIS-Elements proporciona un flujo de trabajo intuitivo para la creación de imágenes multifotónicas. En combinación con las herramientas de programación gráfica como JOBS y la secuencia de iluminación, el entorno operativo integral se puede personalizar completamente para cualquier necesidad.