N-STORM

Dez vezes maior resolução em x, y e z.

A Microscopia Estocástica de Reconstrução Ótica (STORM) reconstrói uma imagem de fluorescência de super-resolução combinando informações de localização precisas para fluoróforos individuais em espécimes fluorescentes complexos. O N-STORM aproveita o potente microscópio invertido Ti2-E da Nikon e aplica localização e reconstrução multicores de alta precisão em três dimensões (xyz) para permitir imagens de super-resolução até dez vezes maior quando comparado com a resolução de microscópios de luz convencionais (até aproximadamente 20 nm em xy).

Esta poderosa tecnologia permite a visualização de interações moleculares no nível nanoscópico, abrindo novos mundos da compreensão científica.

Folheto

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Características principais

Melhoria de dez vezes da resolução axial até 50nm

Além da super-resolução lateral, o N-STORM utiliza métodos próprios para obter um aumento de dez vezes na resolução axial sobre microscópios de luz convencionais e fornecer informações em nanoescala em 3D.

A função 3D-Stack permite que várias imagens 3D STORM de diferentes posições Z sejam capturadas e unidas em uma imagem para criar imagens STORM mais espessas.

Tubulina da célula BSC-1 marcada com Alexa Fluor ^® 647

Melhoria de dez vezes da resolução lateral até 20nm

O N-STORM utiliza informações de localização de alta precisão para milhares de fluoróforos individuais presentes em um campo de visão para criar imagens de "super-resolução" de tirar o fôlego, exibindo resolução espacial que é 10 vezes maior do que os microscópios óticos convencionais.

Células de câncer cervical humano (HeLa S3) marcadas com Alexa Fluor ® 647 (NUP153) e ATTO 488 (TPR)

Fotos cedidas por: Dr. Michael W. Davidson, Laboratório Nacional de Campo Magnético, Universidade do Estado da Flórida

Imagem de super resolução dinâmica

Sistemas óticos e de iluminação recentemente desenvolvidos, otimizados para a tecnologia sCMOS, aumentaram as velocidades de aquisição de imagens em até 10 vezes. Com tempos de aquisição reduzidos de minutos para segundos *, eventos dinâmicos em espécimes vivos podem agora ser capturados com resolução de nível molecular.

* Uso do modo de alta velocidade (área de imagem de 20 μm x 20 μm)

Capacidade de geração de imagens em várias cores

Imagens de super resolução de várias cores podem ser realizadas usando ambos os pares ativador-repórter para geração de imagens de ativação sequencial e rótulos sem ativador para geração de imagens de ativação contínua. Essa flexibilidade permite que os usuários obtenham facilmente insights críticos sobre as propriedades de localização e interação de várias proteínas no nível molecular.

Imagem STORM de 3 cores de uma célula CV-1 corada com anticorpos contra alfa-tubulina (Alexa Fluor® 647; magenta), caveolina (Alexa Fluor® 555; vermelho) e com Alexa Fluor® 488-faloidina (verde) para f -actina

Alta definição, imagens de alta densidade

Óticas de excitação recém-desenvolvidas e melhores taxas de aquisição de imagens proporcionam maior densidade de localização de moléculas, resultando em imagens mais claras de estruturas macromoleculares.

Esquerda: Melhor qualidade de imagem, direita: Antes da melhoria
Barra de escala: 5µm
A qualidade da imagem de super resolução é significativamente melhorada no mesmo tempo de aquisição da imagem.
Amostra: Tubulina de célula BSC-1 marcada com Alexa Fluor® 647, tempo de aquisição: 20 segundos

Área de aquisição de imagem grande

Novas lentes de zoom, intermediárias no sistema de imagens, foram desenvolvidas e otimizadas para um amplo campo de visão. O modo de visão ampla atinge 80 μm x 80 μm, um aumento de 4 vezes na área de imagem em comparação com os modelos anteriores.

Alternância perfeita entre as modalidades de aquisição de imagens para experimentos em escala múltipla

O N-STORM pode ser combinado simultaneamente com um microscópio confocal, como o AX/AX R. Um local desejado em uma amostra pode ser especificado em uma imagem confocal com campo de visão de baixa ampliação / grande e adquirida em super-resolução simplesmente trocando o método de imagem. A combinação de um microscópio confocal com um sistema de super-resolução pode fornecer um método para obter maiores visualizações contextuais das informações de super-resolução.

Objetivas projetados para o N-STORM

Objetivas de imersão em silicone

As objetivas de imersão em silicone usam óleo de silicone de alta viscosidade com um índice de refração próximo ao das células vivas como um líquido de imersão. Devido a essa compatibilidade aprimorada do índice de refração, essas objetivas podem fornecer recursos aprimorados de coleta de fótons e resolução ao executar imagens de super-resolução mais profundamente na amostra. Eles exibem correção superior de aberração cromática e alta transmitância em uma ampla faixa de comprimentos de onda.

CFI SR HP Plan Apocromático Lambda S 100XC Sil

Aprox. Profundidade de 6,5 μm, esquerda: CFI SR HP Plan Apocromático Lambda S 100XC Sil, Direita: Óleo CFI SR HP Apocromática TIRF 100XC

Objetivos de imersão em óleo

Essas objetivas fornecem as altas aberturas numéricas necessárias para a geração de imagens N-STORM. As objetivos de HP (high power) são compatíveis com os lasers de potência ultra-alta necessários para induzir a rápida troca de estado dos fluoróforos. Eles fornecem melhor correção de aberração cromática axial para alcançar o mais alto nível de precisão na localização e no alinhamento de imagens 3D para imagens STORM de várias cores. Os objetivos do tipo AC (auto correction) que suportam o Auto Correction Collar do microscópio Ti2-E permitem um ajuste preciso e fácil do colar de correção.