Microiniezione
La microiniezione è un metodo per iniettare meccanicamente cellule, materiale genetico, peptidi, farmaci o altri agenti esogeni direttamente in cellule o tessuti utilizzando una pipetta molto piccola. Al contrario, del materiale può anche essere rimosso dal campione (per esempi, enucleazione delle cellule). La microiniezione ha numerose applicazioni cliniche e di ricerca, tra cui la trasfezione di cellule tramite iniezione di DNA, la fecondazione mediante iniezione intracitoplasmatica di spermatozoi (ICSI), l'introduzione di cellule staminali embrionali geneticamente modificate in una blastocisti e altro ancora.
Prodotti per Microiniezione
La serie ECLIPSE Ti2 di microscopi invertiti è adatta per varie applicazioni di microiniezione. Le opzioni di micromanipolatore/microiniettore di diversi produttori di terze parti sono compatibili con il Ti2. L'ingrandimento intermedio può essere applicato all'interno del corpo del microscopio Ti2 (1,5X e 2,0X disponibili) per immagini dettagliate utilizzando obiettivi a basso ingrandimento. Sono disponibili varie opzioni di condensatore a lunga distanza di lavoro che non interferiscono con le apparecchiature di micromanipolazione.
I microscopi invertiti ECLIPSE Ts2R e Ts2R-FL possono anche essere attrezzati per la microiniezione, ma presentano un corpo più compatto che si adatta bene agli armadi di biosicurezza e ad altri spazi ristretti. Il modello Ts2R-FL offre inoltre epifluorescenza ad ampio campo utilizzando sorgenti luminose a LED integrate.
Gli stereomicroscopi SMZ25 e SMZ18 possono essere attrezzati anche per lavori di microiniezione. L'SMZ25 presenta una gamma di zoom 25:1 e l'SMZ18 una gamma di 18:1, rendendo possibile la visualizzazione dettagliata delle singole celle.
●: included, ⚬: option
| Serie ECLIPSE Ti2 Microscopi invertiti |
ECLIPSE Ts2R e Ts2R-FL Microscopi invertiti |
SMZ18/SMZ25 Stereomicroscopi |
|
|---|---|---|---|
| Compatibilità con micromanipolatori | yes | yes | yes |
| Integrazione della camera | yes | yes | yes |
| Fonte di illuminazione | LED o alogene | LED | LED o alogene |
| Disponibilità di controllo termico | yes | yes | yes |
| Tecniche di contrasto supportate | Serie ECLIPSE Ti2 | ECLIPSE Ts2R e Ts2R-FL | SMZ18/SMZ25 |
| Campo luminoso | yes | yes | yes |
| Campo oscuro | yes | no | yes |
| Contrasto di interferenza differenziale (DIC) | yes | yes | no |
| Fluorescenza ad ampio campo | yes | Ts2R-FL | yes |
| Contrasto a modulazione avanzata Nikon (NAMC) | yes | yes | no |
| Contrasto in rilievo Nikon | no | yes | no |
| Contrasto coerente obliquo (OCC) | no | no | yes |
| Contrasto di fase | yes | yes | no |
| Osservazione del fuso | no | yes | no |
| Contrasto di volume | Ti2-E | no | no |
Discussione sulla microiniezione
L'importanza della stabilità del sistema per la microiniezione
La microiniezione è un compito di precisione in cui differenze di livello submicrometriche nella posizione possono fare la differenza tra successo e fallimento. Ad esempio, la trasfezione mediante microiniezione di cellule con DNA codificante per un dato costrutto (come una chimera a fusione proteica fluorescente) può avere una diversa percentuale di successo a seconda che il DNA sia stato iniettato nel nucleo piuttosto che nel citoplasma, dove è vulnerabile a Attività dell'enzima DNasi.
Le serie di microscopi invertiti ECLIPSE Ti2 ed ECLIPSE Ts2R di Nikon e gli stereomicroscopi SMZ18/25 sono sistemi stabili e resistenti alle vibrazioni che possono essere utilizzati per lavori di microiniezione.
Controllo ambientale per sistemi modello sensibili
I modelli biologici, siano essi singole cellule, tessuti o organismi interi, sono sensibili ai cambiamenti delle condizioni ambientali. Per questo motivo, viene utilizzata una piastra riscaldante o un apparato simile per mantenere la temperatura appropriata e garantire l'integrità fisiologica del sistema.
Ulteriori informazioni su microiniezione e microscopia
Se desideri saperne di più sulle soluzioni Nikon per la micromanipolazione/microiniezione nel campo della tecnologia di riproduzione assistita (ART), visita la nostra pagina qui.
Glossario
- Compatibilità con micromanipolatori
- La micromanipolazione è necessaria per il controllo e il posizionamento delle micropipette.
- Disponibilità di controllo termico
- La regolazione della temperatura è importante per la salute delle cellule. Nikon offre una varietà di regolatori termici sia per la parte superiore del palco che per l'area di attesa.
- Fonte di illuminazione
- Le sorgenti di illuminazione per le tecniche di contrasto basate sulla luce trasmessa sono spesso diodi a emissione di luce (LED) o lampade alogene. I LED sono una scelta luminosa, ecologica e più efficiente dal punto di vista energetico.
- Integrazione della camera
- Nikon offre una varietà di opzioni per la camera, comprese le opzioni CMOS a colori e monocromatiche veloci.
- Tecniche di contrasto supportate
- Oltre alla microscopia in campo chiaro standard, potrebbe essere necessario applicare altre tecniche di contrasto a seconda del campione e dell'applicazione.