以两倍光学极限分辨率进行活细胞成像。
N-SIM S超分辨率显微镜采用独特的高速结构化照明系统,可实现高达15 fps的采集速度。这使其能以传统光学显微镜两倍的空间分辨率(XY高达115nm)捕捉快速的生物事件。结合N-SIM S和共聚焦显微镜,您可以灵活地选择共聚焦图像中的位点,并切换到超分辨率模式以展现样品细节。
主要特性
15 fps的高速超分辨率成像
尼康的新型高速结构化照明系统采用了一种新颖的图案调制技术,可以快速、精确地切换照明模式。N-SIM S实现了令人难以置信的采集速度(高达15 fps *),可实现活细胞和细胞内动态的超分辨率时间序列成像。
* 2D-SIM模式,512 x 512像素,2毫秒曝光时间
活细胞成像的分辨力是传统光学显微镜的两倍
N-SIM S采用尼康创新的结构化照明显微术方法。这项强大的技术与尼康著名的可以达到无与伦比的1.49数值孔径的物镜结合,N-SIM S几乎使传统光学显微镜的空间分辨力提高了一倍(达到约115 nm *),帮助用户观察到微小的胞内结构及其相互作用。
* 该值是在3D-SIM模式下用488nm激光激发的100nm小球的FWHM测量值。在TIRF-SIM模式中,使用用488nm激光激发的40nm小球实现86nm。
在照明模式之间自动切换
新开发的高速结构化照明技术不仅能够实现快速采集速率,还能实现照明模式之间的自动切换,以及针对不同波长和放大率的结构化照明模式的自动优化。这种扩展的自动化功能可实现快速双色TIRF-SIM成像以及不同SIM模式的多路复用。无论是单模还是多模态成像实验,N-SIM S都能提供易于使用的简化工作流程。
各种观察模式
TIRF-SIM / 2D-SIM模式
此模式可以高速捕捉超分辨率的2D图像,并具有令人难以置信的对比度。TIRF-SIM模式可实现全内反射荧光观察,其分辨力是传统TIRF显微镜的两倍,有助于更好地了解细胞表面的分子相互作用。
3D-SIM模式
3D-SIM模式生成三维结构化照明图案,使横向和轴向分辨力提高两倍。两种重建方法(“slice”和“stack”)可根据应用的要求(例如样品厚度,速度等)优化结果。Slice重建适用于在特定深度成像活细胞,因为它支持轴向超分辨率成像,具有300nm分辨率的光学切片。基于Gustafsson理论的stack重建适用于采集3D数据,因为它能以比slice重建更高的对比度成像更厚的样本。
Immediately before drug application | 10 minutes after |
20 minutes after | 30 minutes after |
NG108细胞的生长锥: Fascin(绿色):GFP-Fascin;Actin(红色):LifeAct-KO
物镜:CFI SR HP Apochromat TIRF 100xC Oil
使用图像分离光学系统,在药物处理后捕获双色长时程图像。记录了fascin从肌动蛋白束中解离和丝状肌动蛋白改变了它们的模式的过程。 fascin和肌动蛋白的共定位和fascin的解离已得到很好的证明。将光学像差和图像失真调整为小于30 nm。
动画来源:国立先进工业科学技术研究院生物医学研究所分子神经生物学小组Minami Tanaka博士和Kaoru Katoh博士
在多尺度实验的成像模式之间无缝切换
N-SIM S可以与共聚焦显微镜(如AX/AX R)同时组合。可以在低放大率/大视野共聚焦图像中指定样本中的期望位置,并且通过简单地切换成像方法以超分辨率拍摄。将共聚焦显微镜与超分辨率系统相结合可以提供获得超分辨率信息的更大上下文视图的方法。