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超分辨率显微镜系统

个人用的超分辨率显微镜,提供与N-SIM S相同的高分辨率

N-SIM E是一款流线型、价格合理的超分辨率系统,可提供传统光学显微镜两倍的分辨率。结合N-SIM E和共聚焦显微镜,您可以灵活地在共聚焦图像中选择一个位置,并轻松切换至超分辨率模式,从而获得更多细节。

下载 N-SIM E样本 (6.16MB)

下载 超分辨率显微镜样本 (15.68MB)


主要特性

分辨率为传统光学显微镜的2倍

借助尼康创新的结构化照明显微方法,并与尼康著名的高数值孔径物镜(NA值高达1.49)相结合,N-SIM E几乎可以使传统光学显微镜的空间分辨率提高一倍(达到约115nm *),从而帮助用户观察到微小的胞内结构及其相互作用。

* 该值是在3D-SIM模式下,通过测量100nm荧光小球的半高全宽而得(488nm激光激发)。

超分辨率图像(3D-SIM)

传统的宽场图像

YFP标记的B16黑色素瘤细胞的微管。
物镜:CFI Apochromat TIRF 100XC Oil(NA 1.49)
图像拍摄速度:大约1.8秒/幅 (视频)
重构方法:slice重构
图像来源:与日本理化研究所,定量生物学中心,细胞极性调节实验室的Yasushi Okada博士合作拍摄

超分辨率图像(3D-SIM)

传统的宽场图像

GFP标记的活的Hela细胞的内质网。
物镜:CFI Apochromat TIRF 100XC Oil(数值孔径1.49)
图像拍摄速度:约1.5秒/帧(视频)
重建方法:Slice
拍摄合作伙伴:福岛医科大学医学院生物医学科学研究所的Ikuo Wada博士


具有1秒/帧的高时间分辨率的超分辨成像

N-SIM E为结构化照明技术提供快速的成像性能,约1秒/帧的时间分辨率,对活细胞成像有效。


拍摄更大的视野

N-SIM E可以获得具有66微米见方的大视野的超分辨率图像。这个更大的成像区域可以为受益于更大视野的应用/样本(例如神经元)提供非常高的吞吐量,从而减少获取数据所需的时间和精力。

重建图像尺寸:1024 x 1024像素(33μmx33μm,100X物镜)

重建图像尺寸:2048 x 2048像素(66μmx66μm,100X物镜)

用TRITC-鬼笔环肽(F-肌动蛋白,橙色)和AlexaFluor®488(微管,绿色)标记的NG108细胞的生长锥

样品来源:国家先进工业科学与技术研究所(AIST)的Shizuha Ishiyama博士和Kaoru Katoh博士


采用3D-SIM模式的轴向超分辨率

3D-SIM模式生成三维结构化照明图案,使横向和轴向分辨率提高一倍。两种重建方法(“slice”和“stack”)可用于优化结果,根据应用的要求(例如样品厚度、速度等)。Slice重建适用于在特定深度成像的活细胞,因为它支持轴向超分辨率成像,具有300nm分辨率的光学切片。基于Gustafsson理论的可选stack重建适用于采集3D数据,因为它能以比slice重建更高的对比度去成像更厚的样本。

3D-SIM图像

传统的宽场图像

枯草芽孢杆菌(膜结构由尼罗红染色,并表达融合了GFP的细胞分裂蛋白DivIVA(绿色)。
超分辨率显微镜可在分裂过程中准确定位蛋白质。
重建方法:slice重建

3D-SIM(3D视图)

宽度:26.16μm,高度:27.11μm,深度:3.36 μm

3D-SIM(最大投影)

小鼠角质(间接免疫标记角蛋白中间丝,Alexa Fluor 488偶联二抗进行成像。)
重建方法:Stack重建
图像来源:亚琛工业大学的Reinhard Windoffer博士


成像模式可在多尺寸实验之间无缝切换

N-SIM E可以与共聚焦显微镜(如A1 +或C2 +)相组合。可以在低放大率/大视野共聚焦图像中指定样本中的期望位置,并且通过简单地切换成像方法以获得超分辨率图像。将共聚焦显微镜与超分辨率系统相结合有利于了解超分辨信息的来龙去脉。

选择在共聚焦图像中拍摄SIM图像的位置

拍摄所选位置的SIM图像


3色多激光超分辨率成像能力

专用于N-SIM E的紧凑型LU-N3-SIM激光台安装有三种最​​常用波长的激光器(488/561/640),可实现多种颜色的超分辨率成像。它能够在分子水平上研究多种目的蛋白质的动态相互作用。


超分辨率显微镜的物镜

硅油物镜

硅油物镜使用高粘度硅油作为浸没液体,其折射率接近活细胞的折射率。这种折射率兼容性的改进,大大改善了深部结构成像时的光子收集能力和分辨率。此外,硅油物镜在宽波长范围内表现出优异的色差校正和高透射率。

CFI SR HP Plan Apochromat Lambda S 100XC Sil

小鼠脑部切片(表达tdTomato的神经元)


浸液物镜

该系统可配置适用于固定样品成像100X油浸型物镜,或适用于活细胞成像的60X水浸型物镜。使用波前像差测量技术对超分辨物镜进行校准和检测,以确保最低可能性的非对称像差和超分辨率成像所需的卓越光学性能。

CFI SR HP Apochromat TIRF 100XC Oil

CFI SR Plan Apochromat IR 60XC WI

CFI SR HP Apochromat TIRF 100XAC Oil


干镜

N-SIM E兼容干镜,无需切换镜头即可实现超分辨率成像和共聚焦成像。低放大倍率、大视野干镜即使在样品组织的周边也能实现高分辨率观察。