Microinjeção
A microinjeção constitui um método para introduzir mecanicamente células, material genético, peptídeos, drogas ou outros agentes exógenos diretamente em células ou tecidos utilizando uma pipeta muito pequena. Por outro lado, o material também pode ser removido da amostra (por exemplo, enucleação de células). A microinjeção apresenta inúmeras aplicações clínicas e de pesquisa, incluindo transfecção de células via injeção de DNA, fertilização por injeção intracitoplasmática de espermatozoides (ICSI), introdução de células-tronco embrionárias geneticamente modificadas em um blastocisto e muito mais.
Produtos para Microinjeção
A série de microscópios invertidos ECLIPSE Ti2 é adequada para várias aplicações de microinjeção. As opções de micromanipuladores/microinjetores de diferentes fabricantes terceirizados são compatíveis com o Ti2. A ampliação intermediária pode ser aplicada dentro do corpo do microscópio Ti2 (1,5X e 2,0X disponíveis) para obtenção de imagens detalhadas utilizando lentes objetivas de baixa ampliação. Estão disponíveis várias opções de condensadores de distância de trabalho longa, que não interferem no equipamento de micromanipulação.
Os microscópios invertidos ECLIPSE Ts2R e Ts2R-FL também podem ser equipados para experimentos de microinjeção e apresentam um corpo mais compacto que se encaixa bem em gabinetes de biossegurança e outros espaços apertados. O modelo Ts2R-FL também fornece epifluorescência de campo amplo utilizando fontes de luz LED integradas.
Os estereomicroscópios SMZ25 e SMZ18 também podem ser equipados para trabalhos de microinjeção. O SMZ25 possui um alcance de zoom de 25:1 e o SMZ18 um alcance de 18:1, tornando possível a visualização detalhada de células únicas.
●: Incluído, ⚬: Opcional
| ECLIPSE Ti2 Series Microscópios invertidos |
ECLIPSE Ts2R e Ts2R-FL Microscópios invertidos |
SMZ18/SMZ25 Estereomicroscópios |
|
|---|---|---|---|
| Compatibilidade com micromanipuladores | yes | yes | yes |
| Integração de câmeras | yes | yes | yes |
| Fonte de iluminação | LED ou halógena | LED | LED ou halógena |
| Disponibilidade de controle térmico | yes | yes | yes |
| Técnicas de contraste suportadas | ECLIPSE Ti2 Series | ECLIPSE Ts2R e Ts2R-FL | SMZ18/SMZ25 |
| Campo claro | yes | yes | yes |
| Campo escuro | yes | no | yes |
| Contraste de interferência diferencial (DIC) | yes | yes | no |
| Fluorescência de campo amplo | yes | Ts2R-FL | yes |
| Contraste de modulação avançado da Nikon (NAMC) | yes | yes | no |
| Contraste de relevo da Nikon | no | yes | no |
| Contraste coerente oblíquo (OCC) | no | no | yes |
| Contraste de fase | yes | yes | no |
| Observação do fuso | no | yes | no |
Discussão de Microinjeção
A importância da estabilidade do sistema para microinjeção
A microinjeção é uma tarefa de precisão em que diferenças submicrométricas de posição podem ser decisivas para determinar o sucesso ou o fracasso da aplicação. Por exemplo, a transfecção de células por microinjeção com DNA codificado para um determinado construto (como uma proteína quimera recombinante em fusão com proteína fluorescente) pode ter uma taxa de sucesso diferente se o DNA for injetado no núcleo e não no citoplasma, onde está vulnerável à atividade da enzima DNase.
As séries de microscópios invertidos ECLIPSE Ti2 e ECLIPSE Ts2R e de estereomicroscópios SMZ18/25, da Nikon, são sistemas estáveis e resistentes à vibração, podendo ser utilizadas para trabalhos de microinjeção.
Controle ambiental para sistemas-modelo sensíveis
Modelos biológicos, sejam células únicas, tecidos ou organismos inteiros, são sensíveis a mudanças nas condições ambientais. Por essa razão, uma placa de aquecimento – ou aparelho similar – é utilizada para manter a temperatura adequada e garantir a integridade fisiológica do seu sistema.
Mais informações sobre microinjeção e microscopia
Se quiser saber mais sobre as soluções da Nikon para micromanipulação/microinjeção no campo da tecnologia de reprodução assistida (ART), visite aqui nossa página.
Glossário
- Compatibilidade com micromanipuladores
- A micromanipulação é necessária para o controle e posicionamento das micropipetas.
- Disponibilidade de controle térmico
- A regulação da temperatura é importante para a saúde das células. A Nikon oferece uma variedade de reguladores térmicos no topo da platina e na área de espera.
- Fonte de iluminação
- As fontes de iluminação para técnicas de contraste baseadas em luz transmitida são, na maioria das vezes, diodos emissores de luz (LEDs) ou lâmpadas halógenas. Os LEDs constituem uma escolha brilhante, ecológica e mais eficiente em termos energéticos.
- Integração de câmeras
- A Nikon oferece uma variedade de opções de câmeras, incluindo opções velozes CMOS monocromáticas e coloridas.
- Técnicas de contraste suportadas
- Além da microscopia de campo claro padrão, outras técnicas de contraste podem ser necessárias, dependendo da amostra utilizada e da aplicação desejada.