Duplicando o limite de resolução convencional de imagens de time lapse em células vivas.
O Microscópio de Super Resolução N-SIM S utiliza um sistema exclusivo de iluminação estruturada de alta velocidade para permitir aquisições de até 15 fps, permitindo que processos biológicos rápidos sejam capturados com o dobro da resolução espacial de microscópios de luz convencionais (até 115nm em XY) . Combinando o N-SIM S e um microscópio confocal, você terá a flexibilidade de selecionar um local na imagem confocal e alternar para super-resolução para visualizar a parte desejada do local em detalhes minuciosos.
Características principais
Imagens de super-resolução de alta velocidade a 15 fps
O novo sistema de iluminação estruturada de alta velocidade da Nikon, utiliza uma nova tecnologia de modulação de padrões para gerar a troca rápida e precisa de padrões de iluminação. O N-SIM S atinge velocidades de aquisição incríveis (até 15 fps *), permitindo a captura de imagens de super resolução de células vivas e dinâmicas intracelulares.
* 2 modo D-SIM, 512 x 512 pixels, tempo de exposição de 2 ms
Imagens de células vivas com o dobro da resolução de microscópios de luz convencionais
O N-SIM S utiliza a abordagem inovadora da Nikon para a tecnologia de microscopia de iluminação estruturada. Ao emparelhar esta tecnologia poderosa com as objetivas da Nikon, que alcançam uma abertura numérica inigualável de 1,49, o N-SIM S quase duplica (para aproximadamente 115 nm *) a resolução espacial dos microscópios de luz convencionais, permitindo a visualização detalhada de estruturas intracelulares minúsculas e suas funções interativas.
* Este valor é a medição FWHM de 100 nm esferas excitadas com um laser de 488 nm no modo 3D-SIM. No modo TIRF-SIM, 86 nm são obtidos usando esferas de 40 nm excitadas com um laser de 488 nm.
Troca automática entre modos de iluminação
A tecnologia de iluminação estruturada de alta velocidade, recentemente desenvolvida, não só permite taxas de aquisição rápidas, mas também troca automática entre modos de iluminação e otimização automatizada de padrões de iluminação estruturada, para diferentes comprimentos de onda e ampliações. Essa automação expandida, permite imagens de TIRF-SIM de 2 cores rápidas, bem como a multiplexação de diferentes modalidades de SIM. O N-SIM S fornece fluxos de trabalho simplificados e fáceis de usar, seja para experimentos de imagem de modo único ou multimodal.
Adquira campos de visão maiores
O N-SIM S pode adquirir imagens de super-resolução com um grande campo de visão de 66 µm quadrados. Essa área de imagem maior permite um rendimento muito alto para aplicações / amostras que se beneficiam de campos de visão maiores, como os neurônios, reduzindo a quantidade de tempo e esforço necessários para obter dados.
Vários modos de observação
Modo TIRF-SIM / 2D-SIM
Este modo captura imagens 2D de super-resolução, em alta velocidade, com contraste incrível. O modo TIRF-SIM permite a observação da Fluorescência de Reflexão Interna Total com o dobro da resolução dos microscópios TIRF convencionais, facilitando uma maior compreensão das interações moleculares na superfície da célula.
Modo 3D-SIM
O modo 3D-SIM gera padrões de iluminação estruturada em três dimensões para proporcionar uma melhoria de duas vezes nas resoluções lateral e axial. Dois métodos de reconstrução (“fatias” e “pilhas”) estão disponíveis para otimizar os resultados de acordo com os requisitos da aplicação (por exemplo, espessura da amostra, velocidade, etc.). A reconstrução de fatias é adequada para imagens de células vivas em profundidades específicas, pois permite imagens de super-resolução axial com corte óptico na resolução de 300 nm. A reconstrução de pilha, baseada na teoria de Gustafsson, é adequada para a aquisição de dados de volume, pois pode produzir imagens de amostras mais espessas com maior contraste do que a reconstrução de cortes.
Imagem simultânea de dois canais
É possível obter imagens simultâneas em duas cores, utilizando um adaptador opcional de duas câmeras * e duas câmeras sCMOS.
* Andor Technology Ltd.
Immediately before drug application | 10 minutes after |
20 minutes after | 30 minutes after |
Growth cone of NG108 cells. Fascin (green): GFP-Fascin, Actin (red): LifeAct-KO Objective Lens : CFI SR HP Apochromat TIRF 100xC oil
Using image splitting optical system, dual color time-lapse images were captured after application of drug solution. The time course was recorded that fascin was dissociated from the actin bundles and filamentous actin changed their pattern. Co-localization of fascin and actin and dissociation of fascin were well demonstrated. Optic aberrations and image distortion were adjusted to be less than 30 nm.
Movie courtesy of: Dr. Minami Tanaka, Dr. Kaoru Katoh, Biomedical Research Institute Molecular Neurobiology Group, National Institute of Advanced Industrial Science and Technology
Alternância perfeita entre as modalidades de aquisição de imagens para experimentos de múltiplas escalas
O N-SIM S pode ser combinado simultaneamente com um microscópio confocal como o AX/AX R. Um local desejado em uma amostra pode ser especificado em uma imagem confocal com campo de visão de baixa ampliação / grande e adquirida em super-resolução simplesmente trocando o método de imagem. A combinação de um microscópio confocal com um sistema de super-resolução pode fornecer um método para obter maiores visualizações contextuais de informações de super-resolução.
Objetivas para microscópios de super-resolução
Objetivas de imersão em silicone
As objetivas de imersão em silicone usam óleo de silicone de alta viscosidade com um índice de refração próximo ao das células vivas como um líquido de imersão. Devido a essa compatibilidade aprimorada do índice de refração, esses objetivos podem fornecer recursos aprimorados de coleta de fótons e resolução ao executar imagens de super-resolução mais profundamente na amostra. Eles exibem correção superior de aberração cromática e alta transmitância em uma ampla faixa de comprimentos de onda.
Objetivas de imersão
O sistema pode ser configurado com um tipo de imersão em óleo de 100X, que é adequado para a geração de imagens de amostras fixas, ou um tipo de imersão em água de 60X, que é ideal para imagens de células vivas em time lapse.As objetivas do SR são alinhados e inspecionados usando tecnologias de medição de aberração de frente de onda para garantir a aberração assimétrica mais baixa possível e o excelente desempenho óptico requerido para imagens de super-resolução.
Objetivo seco
O N-SIM S é compatível com objetivas secas, disponibilizando imagens de super-resolução e imagens confocais sem trocar de lentes. Lentes secas de amplo campo de visão e baixa ampliação permitem a observação em alta resolução mesmo na periferia dos tecidos da amostra.
* Objetivos secos suportam reconstrução de fatia