N-STORM

超分辨率显微镜系统

结构化照明显微镜的原理

随机光学重建显微术(STORM)通过整合单个荧光团在三维和多色成像上的高精度定位来重建超分辨率图像。

N-STORM使用非常低强度的光来随机激活相对少量的荧光基团。荧光基团的这种随机 “激活”支持单个分子的时间分离,使得能够在XY中对每个荧光基团图像进行高精度高斯拟合。通过使用特殊的3D-STORM光学系统,N-STORM还可以高精度地沿Z轴定位各个分子。结合三维的分子坐标,用户可以得到超分辨率的3D图像。


高精度Z轴位置检测

使用在X或Y方向上不对称地聚光光束的柱面透镜,用户能以约50nm的精度定位Z轴分子位置。通过检测在X或Y方向上的像散引起的拉伸的方向和非焦面图像的尺寸来确定Z轴的位置。将确定的Z轴位置信息与XY轴位置信息整合,即可重建3D荧光图像。


满足高精度定位的各类光控探针和标记方式

多种活化基团-报告基团染料对以及不含活化基团的标记方式均可使用。活化基团-报告基团染料对的方式是通过在不同通道之间使用相同的报告染料,以确保得到一致的定位精度。每个染料对由活化染料和报告染料组成。活化染料调节报告染料的激活状态。

不含活化基团的标记仅由成像染料组成,只需简单的样本标记和制备技术即可,例如使用常规染料藕联抗体的传统间接免疫荧光法。