细胞培养

细胞培养对比技术

体外培养的细胞种类繁多，包括刚从组织中获得的原代细胞、永生细胞系和干细胞。这些不同类型的细胞具有相似的成像挑战。

细胞观察的难点在于细胞基本上是高度透明的，这点限制了常规的明场透射光显微镜的使用。因此，组织培养显微镜往往要配备相差成像，一种利用干涉将细微的光路长度差异转换成对比度的技术（甚至是在几乎透明的样本中）。重要的是，和偏振成像技术（如微分干涉（DIC））不同，相差技术对塑料培养容器有着良好的兼容性。

与明场成像相比，即使在低倍下（放大倍率在4 – 20X的物镜最常用于细胞培养），相差成像也能相对容易地识别单个细胞。但是，相差成像需要专用的物镜和照明光路中放入对应的环形挡板。此外，可供选择的相差物镜种类繁多。

尼康专用于切跖相差的CFI Achromat系列物镜能减轻大光程差区域中出现的光晕现象，是细胞培养观察的得力物镜。与标准相差物镜相比，该系列物镜更易于识别细胞边界并精确观察较大的模式系统，如组织和完整生物体。

荧光成像与细胞培养

荧光成像已成为组织培养实验室中越来越常规的需求。例如，实验室中的一项常见工作就是检查转染细胞荧光蛋白融合的表达，其对于评价转染效率、正确定位和表达水平至关重要。荧光染色还广泛用于显示关键的亚细胞成分（如活细胞中染色细胞核的Hoechst染料）。

Ts2-FL最多可配置三个LED照明模块，均内置在显微镜中。该显微镜能自动记忆每个滤光块位置所使用的LED和最后一次使用的亮度设置。尼康还提供可选配的遮光板附件，解决了在明亮培养室中经常遭遇的背景光问题。

尺寸和舒适性的重要性

细胞培养是一项重复性很强的工作，因此需要一个符合人体工程学设计的系统，优先要考虑使用的简单化和移动的经济性。Ts2控制按钮根据其使用目的布置，如开/关和透射/落射荧光切换按钮布置在前面板上，透射光照明按钮和落射荧光照明控制按钮分别位于显微镜机身两侧。

为确保无菌环境和细胞健康，组织培养显微镜通常放置在生物安全柜中。因此，紧凑型显微镜更有利于此类工作。此外，这类显微镜载物台位置较低，与载物台位置较高的显微镜相比，坐着进行样品重复交换更容易，更符合人体工程学。