物镜

浸没式物镜类型比较

水浸物镜的特点

  • 是观察培养液中的培养细胞和其他标本的最佳选择,因为其折射率接近培养细胞和培养液的折射率,所以球差极小。
  • 是体内观察和活体组织碎片观察的最佳选择,因为其折射率接近生物体液的折射率,因此具有高度的生物相容性。
  • 当与补水装置一起使用也很有效,可以根据需要补充浸液,例如用于多孔中的多点观察时。

硅油物镜的特点

  • 在进行深度观察时,由于其折射率接近许多3D细胞培养(球状体、类器官等)和高折射率器官(肝脏等)的折射率,所以球差极小。
  • 即使在37℃下,油仍具有稳定性和耐干燥性,所以该物镜是长时间、延时观察的最佳选择。

用于硅油物镜的油:硅油30cc

油浸物镜的特点

  • 因为其数值孔径(NA)在所有浸没式物镜中是最大的,所以适用于需要高分辨率的观察。
  • 是观察样本表面(盖玻片附近)的最佳选择,因为其折射率接近盖玻片的折射率(ne=1.53)。
  • 是观察使用封片剂的锚定标本的最佳选择,因为其折射率接近许多封片剂的折射率。

甘油浸没式(透明化样本)物镜的特点

  • 可以对透明化样本进行深度观察,因为甘油折射率接近许多常用透明剂的折射率。
  • 可以与各种透明剂一起使用。
  • 可以通过校正环优化球差校正,以匹配使用的透明剂的折射率。

适用于甘油浸液(用于透明化)物镜的透明剂示例:

Sca/e(n=1.38)*, CUBIC2(n=1.48), LUCID(n=1.47), FocusClear(n=1.45), CRARITY(n=1.45), SeeDB(n=1.48)

*折射率取决于生物体

浸没式物镜的比较

浸没介质
(可能的放大倍率范围)
水(20X-60X) 硅油(25X-100X) 油(40X-100X) 甘油(10X-20X)
浸没液折射率 水(ne=1.33) 硅油(ne=1.41) 油(ne=1.52) 透明剂(ne=1.33~1.51:10X, ne=1.44~1.50: 20X),甘油(ne=1.45)
可供观察的适用活体样本 培养细胞
低折射率动物组织和器官(小鼠大脑等)
观察必须具有生物相容性(体内观察等)
需要对多孔进行多点观察的观察(使用补水装置)
3D细胞培养(球状体、类器官等)
高折射率动物组织和器官(肝脏等)
长时间、延时观察
需要高分辨率的培养细胞和组织碎片(样本表面)
可供观察的适用锚定样本 锚定培养细胞
低折射率锚定器官碎片(小鼠大脑等)
锚定碎片,比如高折射率器官(肝脏等) 培养细胞(含封片剂)
组织碎片(含封片剂)
透明化样本(球状体、类器官、器官等)